1.Anspach,F.,Curbelo,D.,Hatrmann,R.,Garke,G.,andDecwer,W.Expanded-bedchromatographyinprimaryproteinpurification.J.Chromatogr.A1999;865:129-144.2.Richardson,J.F.andZaki,W.N.Sedimentationandfluidization:PartI.Trans.Inst.Chem.Eng.1954;32:35-52.3.Thommes,J.Fl...[繼續閱讀]

    對于少量樣品(如約100mL),首先用結合緩沖液(pH值和離子強度參照吸附劑的適合條件)平衡吸附劑,然后將吸附劑與原材料在試管或燒瓶中混合。如果吸附劑粒徑小且載體無孔的話,那么只需幾分鐘(通常5min即足夠)即可達到吸附平衡狀態...[繼續閱讀]

    下面通過實驗解釋如何評估磁力吸附劑對目標蛋白的回收效能。實驗選用的原材料為添加有胰蛋白酶的干酪乳清;磁力載體經苯甲脒(一種絲氨酸蛋白酶抑制劑)衍生化[14],得到含有苯甲脒基團的磁力吸附劑。本例中,我們希望展示能解...[繼續閱讀]

    高梯度磁力分離(high-gradientmagneticseparation,HGMS)的基本原理很簡單,類似于深層過濾[16-21]。事實上,HGMS可以被認為是一種深層過濾系統,不同的是它在傳統的深層過濾系統的運送機制中添加了磁引力。它的罐體中填充著可磁化的分離基質...[繼續閱讀]

    從分批結合步驟到利用高效磁力過濾器處理吸附劑(即吸附劑的捕獲、清洗和洗脫)的整體過程,我們稱之為HGMF[1]。該技術已經被廣泛應用于從不同原材料中捕獲蛋白質[1-14]。圖3.2和圖3.3分別呈現了典型的HGMF過程簡圖和半工業化的HG...[繼續閱讀]

    如圖3.6所示,對于基本HGMF過程的設計,將整個開發分為多個階段是非常方便的,這在參考文獻11中也有報道。過程設計首先應確定最合適的配體類型和磁力吸附劑,然后優化結合、清洗和洗脫條件。接下來是磁力過濾器捕獲階段,還應包括...[繼續閱讀]

    目前,多種不同設計的磁力載體材料已商品化,并且已應用于一些小規模的生物技術實驗中(如質粒分離、細胞分選、常規診斷等)。如表3.1所示,作為一種磁力敏感型吸附劑,它的很多特性都與傳統色譜介質的特性相似,但也具備一些特殊...[繼續閱讀]

    一旦確定合適的超順磁載體,那么接下來對配體的選擇也將是至關重要的。通過對目標蛋白、原材料和現有文獻的了解,我們有可能得出高效配體的特點。但是,對于一個新蛋白質而言,我們必須通過篩選吸附劑的方法來確定合適的配體...[繼續閱讀]

    最近,Meyer及其同事[11]以從天然干酪乳清中回收超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)為例,提出了HGMF過程開發的一般策略(圖3.6)。他們指出,HGMF吸附劑在各個階段的最適使用條件可以通過小規模(1～5mL)分批實驗迅速確定,直接傳遞入HGMF過...[繼續閱讀]

    目前,由于缺少市場,還沒有適合于工業化下游工程的商品化磁力分離系統。盡管如此,磁力分離的物理原理、由平行的大規模生產獲得的多樣化設計及其固有優勢,為其在即將到來的工業化下游工程中的應用進展提供了堅實的基礎。磁...[繼續閱讀]